Назначение
Устройства компьютеризированные четырехканальные для обнаружения в режиме реального времени флуоресцентной детекцией специфической последовательности нуклеиновых кислот методом полимеразной цепной реакции «АНК» (далее по тексту -приборы) предназначены для мультиканального измерения концентрации конечного продукта полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени.
Приборы применяются в клинико-диагностических лабораториях медицинских учреждений и в научно-исследовательских институтах различного профиля.
Описание
Принцип действия приборов основан на измерении флуоресцентного сигнала, испускаемого в ходе полимеразной цепной реакции под воздействием излучения возбуждения, в каждом цикле температурно-кинетической амплификации генетического материала, с использованием в ПЦР смеси специфических олигонуклеотидов-затравок, нуклеотидтрифосфатов и фермента полимеразы. Интенсивность флуоресцентного сигнала пропорциональна концентрации продукта ПЦР. Измерение концентрации продуктов ПЦР в режиме реального времени осуществляется введением в реакцию флуоресцирующих красителей, сообщающих об увеличении количества дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) искомого типа, пропорционального увеличению флуоресцентного сигнала.
Интенсивность флуоресцентного излучения, испускаемого образцом, измеряется фотометрической системой регистрации прибора и индицируется на экране монитора внешнего компьютера в относительных единицах. При этом результаты измерений линейны в диапазоне концентрации красителя (флуоресцеина) от 1,0 до 10,0*10’8 моль/л.
Конструктивно прибор выполнен в виде раздельных модулей: нижнего - теплового модуля (амплификатора) и верхнего - оптического блока, которые в сочетании образуют систему для амплификации и измерения продуктов ПЦР в режиме реального времени.
Оптический блок фотометрической системы регистрации содержит:
- систему возбуждения, состоящую из вольфрамовой галогенной лампы, теплового фильтра (стекло, поглощающее инфракрасное излучение), пятипозиционной карусели с оптическими фильтрами возбуждения;
- систему детектирования, основными компонентами которой являются пятипозиционная карусель с оптическими фильтрами регистрации, ФЭУ, обеспечивающий количественное определение флуоресценции в лунках.
Тепловой модуль (амплификатора) содержит термоциклер на основе элементов Пельтье, встроенную нагреваемую крышку и луночный блок для размещения 16, 32 или 96 образцов.
Управление системой осуществляется с внешнего IBM-совместимого компьютера с процессором Intel Pentium™ или Celeron™ с частотой не ниже 1,0 ГГц, оснащенного специальным программным обеспечением «ANK.exe».
Технические характеристики
Диапазон измерений флуоресценции, усл.ед.
Пределы отклонения от линейности (при измерении концентрации флуоресцеина в диапазоне концентраций от 1,0 до 10,0*10'8 моль/л), % Предел допускаемого среднего квадратического отклонения результата измерения, %
Объем проб для анализа, мкл
Количество лунок для пробирок с пробами
Диапазон рабочих температур термостатирования, °C,
Разброс температуры по лункам, °C
Скорость изменения температуры в цикле, °С/сек, не менее
Количество каналов возбуждения и регистрации флуоресценции
Длины волн возбуждения флуоресценции, нм
Длины волн регистрации флуоресценции, нм
Напряжение питающей сети, В
Частота питающей сети, Гц
Потребляемая мощность, ВА, не более
Габаритные размеры (ВхШхГ), мм, не более
Масса, кг, не более
Рабочий диапазон температуры окружающей среды, °C
Рабочий диапазон относительной влажности окружающего воздуха (при 25 °C), % Рабочий диапазон атмосферного давления, кПа
от 10 до 70000
±20
5,0
от 5 до 100
16, 32 или 96
от 4 до 99 ±0,4 1,2
4
485,530, 580, 630
520,560, 620, 670
220 ± 22
50
800
370x450x450
26
от 15 до 35
от 20 до 80
от 84 до 106
Знак утверждения типа
Знак утверждения типа наносят на титульный лист руководства по эксплуатации типографским способом и на шильдик прикрепленный к прибору.
Приложение к свидетельству № СтраницаЗ
об утверждении типа средства измерений Страниц 4
Комплектность
Устройства компьютеризированного четырехканального для обнаружения в режиме реального времени флуоресцентной детекцией специфической последовательности нуклеиновых кислот методом полимеразной цепной реакции «АНК» имеют следующую комплектность:
| Наименование | Обозначение или основные характеристики | Количество, шт. |
| 1. Устройство «АНК» в вариантном исполнении (термоциклер с 16, 32 или 96 пробирками) 2. Шнур сетевой 3. Жгут 4. Кабель «RS-232» 5. Транспортная тара 6. Персональный компьютер 7. Компакт-диск с программным обеспечением | ДШИ.2.848.000 SCZ-1, Тайвань 35Л231.26.00 ГОСТ Р 50444 ШМ-компьютер совместимый с процессором Intel Pentium™ или Celeron™ с частотой не ниже 1,0 ГГц «ANK.exe» | 1 1 1 1 1 Поставляется по требованию заказчика 1 |
| Запасные части, инструмент и принадлежности | | |
| 8. Комплект запасных частей, инструмента и принадлежностей - Контрольный образец (флуоресцеин - 0,5 г) - Пробирки объемом 0,2 мл | ДШИ.2.848.000 ЗИ ТУ 6-09-2464-82 Фирма «Axygene» (США) | 1 комплект 1 100 |
| - тестовая смесь PC «АМТЕтест» | тестовая смесь объемом 0,8 мл производства ЗАО «Синтол» | 1 набор |
| 9. Эксплуатационные документы: - Руководство по эксплуатации с методикой поверки (раздел 10) - Паспорт | ДШИ.2.848.000 РЭ ДШИ.2.848.000 ПС | 1 1 |
Поверка
Устройства компьютеризированного четырехканального для обнаружения в режиме реального времени флуоресцентной детекцией специфической последовательности нуклеиновых кислот методом полимеразной цепной реакции «АНК» подлежат первичной и периодической поверке в соответствии с методикой поверки раздел 10 Руководства по эксплуатации, утвержденной ГЦИ СИ ФГУ «Ростест-Москва» в декабре 2009 г.
Межповерочный интервал -1 год.
Средства поверки:
- аттестованные смеси-растворы флуоресцеина с концентрацией 1,25; 2,5; 5,0; 10,0*10’8 моль/л, приготовленные в соответствии с требованиями РМГ 60-2003 «ГСИ. Смеси аттестованные. Общие требования к разработке», погрешность приготовления не более ±5,0%. Процедура приготовления аттестованных смесей-растворов включена в методику поверки.
- флуоресцеин ТУ 6-09-2464-82 ч;
- весы электронные АТ201, номер по Государственному реестру 18949-99;
- дозаторы одноканальные переменного объема Pipetman Р исп. Р100 (20 - 100 мкл) и исп. Р1000 (200 -1000 мкл) номер по Государственному реестру 28123-04;
Приложение к свидетельству № Страница4
об утверждении типа средства измерений Страниц 4
- тестовая смесь PC «АМТЕтест», производства ЗАО «Синтол», смесь флуоресцентных красителей FAM и ROX с концентрацией 20*10'8 моль/л и погрешностью приготовления не более ±10,0%.
Нормативные документы
Технические условия ТУ 9443-003-04699534-2005.
ГОСТ Р 50444-92. «Приборы, аппараты и оборудование медицинские. Общие технические условия».
РМГ 60-2003 «ГСИ. Смеси аттестованные. Общие требования к разработке».
МИ 2639-2001. ГСИ. «Государственная поверочная схема для средств измерений массовой доли компонентов в веществах и материалах».
Заключение
Тип «Устройство компьютеризированное четырехканальное для обнаружения в режиме реального времени флуоресцентной детекцией специфической последовательности нуклеиновых кислот методом полимеразной цепной реакции «АНК»» утвержден с техническими и метрологическими характеристиками, приведенными в настоящем описании типа, метрологически обеспечен при выпуске из производства и в эксплуатации согласно государственной поверочной схеме МИ 2639-2001.
Выдано Регистрационное удостоверение Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития РФ № ФС 022а2005/2163-05 от 23.08.2005 года.
